生物安全柜是一種在微生物學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、基因重組、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、生物制品等領(lǐng)域的科研、教學(xué)、臨床檢驗(yàn)和生產(chǎn)中廣泛使用的安全設(shè)備，也是實(shí)驗(yàn)室生物安全中防護(hù)屏障中zui基本的安全防護(hù)設(shè)備。
　　
　　在2003年SARS暴發(fā)流行和高致病性禽流感發(fā)生后，特別是2003～2004年三起實(shí)驗(yàn)室SARSCoV感染事故的發(fā)生，使政府、廣大科研工作人員對(duì)生物危害有了較為深刻的認(rèn)識(shí)。2004年，發(fā)布了424號(hào)令《病原微生物實(shí)驗(yàn)室過濾條例》和標(biāo)準(zhǔn)《實(shí)驗(yàn)室——生物安全通用要求》GB19489—2004，明確指出生物安全柜作為一種微生物實(shí)驗(yàn)室的主要安全設(shè)備，對(duì)保護(hù)實(shí)驗(yàn)室工作人員是*的。規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化地使用生物安全柜，能對(duì)人員、環(huán)境、受試樣品提供保護(hù)。已經(jīng)研制的生物安全柜分為三類：Ⅰ級(jí)柜、Ⅱ級(jí)柜和Ⅲ級(jí)柜，它們能滿足各方面的實(shí)驗(yàn)和臨床需要。
　　
　　生物安全柜的功能、用途、結(jié)構(gòu)、排氣系統(tǒng)和/或供氣系統(tǒng)（粒子空氣濾器），以及實(shí)驗(yàn)室選擇生物安全柜的基本原則、安裝原則和要求、實(shí)驗(yàn)室操作程序、日常維護(hù)要求等內(nèi)容。這些內(nèi)容是實(shí)際使用和操作生物安全柜時(shí)必須掌握的知識(shí)。
　　
　　大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室工作人員對(duì)生物安全柜的性能、選擇、操作和維護(hù)等方面的知識(shí)非常缺乏，常常混淆生物安全柜與超凈工作臺(tái)這兩種設(shè)備。其實(shí)兩者之間是有本質(zhì)區(qū)別的，生物安全柜是一種負(fù)壓的凈化工作臺(tái)，正確操作生物安全柜，能夠*保護(hù)工作人員、受試樣品并防止交叉污染的發(fā)生；而超凈工作臺(tái)只是保護(hù)操作對(duì)象而不保護(hù)工作人員和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的潔凈工作臺(tái)。因此，在微生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)的科研、教學(xué)、臨床檢驗(yàn)和生產(chǎn)中，應(yīng)該選擇和使用生物安全柜，而不能夠選擇和使用超凈工作臺(tái)。
　　
　　生物安全柜設(shè)計(jì)、生產(chǎn)和檢測(cè)驗(yàn)證中使用的各種術(shù)語和定義、分類、設(shè)計(jì)、結(jié)構(gòu)和性能的基本要求、試驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則、標(biāo)志、標(biāo)簽和說明書、包裝、運(yùn)輸和貯存的要求、檢測(cè)驗(yàn)證方法、檢測(cè)儀器的選擇和校準(zhǔn)、產(chǎn)品出廠檢驗(yàn)要求、現(xiàn)場檢驗(yàn)要求等。
　　
　　生物安全柜的選擇生物安全柜（Biologicalsafetycabinets,BSCs）是為操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標(biāo)本等具有感染性的實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，用來保護(hù)操作者本人、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境以及實(shí)驗(yàn)材料，使其避免暴露于上述操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)計(jì)的。
　　
　　WHO《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》提出，生物安全柜可以有效減少由于氣溶膠暴露所造成的實(shí)驗(yàn)室感染以及培養(yǎng)物交叉污染。生物安全柜同時(shí)也能保護(hù)工作環(huán)境。
　　
　　事實(shí)上，生物安全柜更側(cè)重于保護(hù)操作人員和環(huán)境，防止操作的病原微生物擴(kuò)散造成人員傷害和環(huán)境污染。
　　
　　根據(jù)生物安全防護(hù)水平的差異，生物安全柜可分為、二級(jí)和三級(jí)三種類型。生物安全柜可保護(hù)工作人員和環(huán)境而不保護(hù)樣品。其氣流原理和實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)櫥基本相同，不同之處在于排氣口安裝有HEPA過濾器，將外排氣流過濾進(jìn)而防止微生物氣溶膠擴(kuò)散造成污染。生物安全柜本身無風(fēng)機(jī)，依賴外接通風(fēng)管中的風(fēng)機(jī)帶動(dòng)氣流，由于不能保護(hù)柜內(nèi)產(chǎn)品，目前已較少使用。
　　
　　*是目前應(yīng)用的柜型。按照《中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YY0569-2005生物安全柜》中的規(guī)定，*依照入口氣流風(fēng)速、排氣方式和循環(huán)方式可分為4個(gè)級(jí)別：A1型，A2型，B1型和B2型。所有的*都可提供工作人員、環(huán)境和產(chǎn)品的保護(hù)。
　　
　　A1型安全柜前窗氣流速度zui小量或測(cè)量平均值應(yīng)至少為0.38m/s。無內(nèi)部循環(huán)氣流，的氣體通過排氣口過濾排出。
　　
　　A2型安全柜前窗氣流速度zui小量或測(cè)量平均值應(yīng)至少為0.5m/s。70%氣體通過HEPA過濾器再循環(huán)至工作區(qū)，30%的氣體通過排氣口過濾排出。
　　
　　二級(jí)B型生物安全柜均為連接排氣系統(tǒng)的安全柜。連接安全柜排氣導(dǎo)管的風(fēng)機(jī)連接緊急供應(yīng)電源，目的在斷電下仍可保持安全柜負(fù)壓，以免危險(xiǎn)氣體泄漏入實(shí)驗(yàn)室。其前窗氣流速度zui小量或測(cè)量平均值應(yīng)至少為0.5m/s（100fpm）。
　　
　　B1型70%氣體通過排氣口HEPA過濾器排除，30%的氣體通過供氣口HEPA過濾器再循環(huán)至工作區(qū)。
　　
　　B2型為全排型安全柜，無內(nèi)部循環(huán)氣流，可同時(shí)提供生物性和化學(xué)性的安全控制，可以操作揮發(fā)性化學(xué)品和揮發(fā)性核放射物作為添加劑的微生物實(shí)驗(yàn)。
　　
　　三級(jí)生物安全柜是為生物安全防護(hù)等級(jí)為4級(jí)實(shí)驗(yàn)室而設(shè)計(jì)的，柜體*氣密，工作人員通過連接在柜體的手套進(jìn)行操作，俗稱手套箱（Golvebox），試驗(yàn)品通過雙門的傳遞箱進(jìn)出安全柜以確保不受污染，適用于高風(fēng)險(xiǎn)的生物試驗(yàn)，如進(jìn)行SARS、埃博拉病毒相關(guān)實(shí)驗(yàn)等。
　　
　　根據(jù)生物安全柜的強(qiáng)制性行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YY0569-2005生物安全柜》規(guī)定，只有獲得食品頒發(fā)的三類醫(yī)療器械注冊(cè)證的產(chǎn)品才能真正保護(hù)操作人員、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和操作樣本。
　　
　　超凈工作臺(tái)（LAMINARFLOWCABINET）（CleanBenches），為了保護(hù)實(shí)驗(yàn)材料而設(shè)計(jì)的，通過風(fēng)機(jī)將空氣吸入預(yù)過濾器，經(jīng)由靜壓箱進(jìn)入過濾器過濾，將過濾后的空氣以垂直或水平氣流的狀態(tài)送出，使操作區(qū)域達(dá)到百級(jí)潔凈度，保證生產(chǎn)對(duì)環(huán)境潔凈度的要求。
　　
　　超凈工作臺(tái)只能保護(hù)樣品，不保護(hù)操作人員。
　　
　　從潔凈級(jí)別看，生物安全柜也比超凈工作臺(tái)。
　　
　　超凈臺(tái)的優(yōu)點(diǎn)是操作方便自如，比較舒適，工作效率高，預(yù)備時(shí)間短，開機(jī)１０分鐘以上即可操作，基本上可隨時(shí)使用。在工廠化生產(chǎn)中，接種工作量很大，需要經(jīng)常長久地工作時(shí)，超凈臺(tái)是很理想的設(shè)備。超凈臺(tái)由三相電機(jī)作鼓風(fēng)動(dòng)力，功率１４５～２６０Ｗ左右，將空氣通過由特制的微孔泡沫塑料片層疊合組成的“超級(jí)濾清器”后吹送出來，形成連續(xù)不斷的無塵無菌的超凈空氣層流，即所謂“的特殊空氣”，它除去了大于０．３μｍ的塵埃、真菌和細(xì)菌孢子等等。超凈空氣的流速為２４～３０ｍ／ｍｉｎ，這已足夠防止附近空氣可能襲擾而引起的污染，這樣的流速也不會(huì)妨礙采用酒精燈、本生燈（BunsenBurner）或電子火焰自凈器對(duì)器械等的灼燒消毒。工作人員就在這樣的無菌條件下操作，保證無菌材料在轉(zhuǎn)移接種過程中不受污染。但是萬一操作中途遇到停電，暴露在未過濾空氣中的材料便難以避免污染。這時(shí)應(yīng)迅速結(jié)束工作，并在瓶上作出記號(hào)，內(nèi)中的材料如處于增殖階段，則以后不再用作增殖而轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)。如為一般性生產(chǎn)材料，因其豐富也可棄去。如處于生根過程，則可留待以后種植用。
　　
　　超凈臺(tái)電源多采用三相四線制，其中有一零線，連通機(jī)器外殼，應(yīng)接牢在地線上，另外三線都是相線，工作電壓是３８０Ｖ。三線接入電路中有一定的順序，如線頭接錯(cuò)了，風(fēng)機(jī)會(huì)反轉(zhuǎn)，這時(shí)聲音正常或稍不正常，超凈臺(tái)正面無風(fēng)可用酒精燈火焰觀察動(dòng)靜，不宜久試，應(yīng)及時(shí)切斷電源，只要將其中任何兩相的線頭交換一下位置再接上，就可解決。三相線如只接入兩相，或三相中有一相接觸不良，則機(jī)器聲音很不正常，應(yīng)立即切斷電源仔細(xì)檢修，否則會(huì)燒毀電機(jī)。這些常識(shí)應(yīng)在開始使用超凈臺(tái)時(shí)就向工作人員講解清楚，免除不應(yīng)造成的事故與損失。
　　
　　超凈臺(tái)進(jìn)風(fēng)口在背面或正面的下方，金屬網(wǎng)罩內(nèi)有一普通泡沫塑料片或無紡布，用以阻攔大顆粒塵埃，應(yīng)常檢查、拆洗，如發(fā)現(xiàn)泡沫塑料老化，要及時(shí)更換。除進(jìn)風(fēng)口以外，如有漏氣孔隙，應(yīng)當(dāng)堵嚴(yán)，如貼膠布，塞棉花，貼膠水紙等。工作臺(tái)正面的金屬網(wǎng)罩內(nèi)是超級(jí)濾清器，超級(jí)濾清器也可更換，如因使用年久，塵粒堵塞，風(fēng)速減小，不能保證無菌操作時(shí)，則可換上新的。
　　
　　超凈臺(tái)使用壽命的長短與空氣的潔凈程度有關(guān)。在溫帶地區(qū)超凈臺(tái)可在一般實(shí)驗(yàn)室使用，然而在熱帶或亞熱帶地區(qū)，由于大氣中含有高量的花粉，或多粉塵的地區(qū)，超凈臺(tái)則宜放在較好的有雙道門的室內(nèi)使用。任何情況下都不應(yīng)將超凈臺(tái)的進(jìn)風(fēng)罩對(duì)著開敞的門或窗，以免影響濾清器的使用壽命。
　　
　　無菌室應(yīng)定期用７０％酒精或０．５％苯酚噴霧降塵和消毒，用２％新潔爾滅抹拭臺(tái)面和用具７０％酒精也可，用福爾馬林４０％甲醛加少量高錳酸鉀定期密閉熏蒸，配合紫外線自凈燈每次開啟１５分鐘以上等等消毒自凈手段，以使無菌室經(jīng)常保持高度的無菌狀態(tài)。接種箱內(nèi)部也應(yīng)裝有紫外線燈，使用前開燈１５分鐘以上照射自凈，但凡是照射不到之處仍是有菌的。在紫外線燈開啟時(shí)間較長時(shí)，可激發(fā)空氣中的氧分子締合成臭氧分子，這種氣體成分有很強(qiáng)的自凈作用，可以對(duì)紫外線沒有直接照到的角落產(chǎn)生自凈效果。由于臭氧有礙健康，在進(jìn)入操作之前應(yīng)先關(guān)掉紫外線燈，關(guān)后十多分鐘即可入內(nèi)。
　　
　　在超凈工作臺(tái)上亦可吊裝紫外線燈，但應(yīng)裝在照明燈罩之外，并錯(cuò)開照明燈平行排列，這樣在工作時(shí)不妨礙照明。若將紫外線燈裝入照明燈罩玻璃板里面，這是毫無用處的，因?yàn)樽贤饩€不能穿透玻璃，它的燈管是石英玻璃，而不是硅酸鹽玻璃制成的。
　　
　　接種室內(nèi)力求簡潔，凡與本室工作無直接關(guān)系的物品一律不能放入，以利保持無菌狀態(tài)。接種室內(nèi)的空氣與外界空氣應(yīng)隔絕，預(yù)留的通氣孔道應(yīng)盡量密閉。通氣孔道可設(shè)上下氣窗，氣窗面積宜稍大，需覆上４層紗布作簡單濾塵。在一天工作之后，可開窗充分換氣，然后再予以密閉。總之，既要清潔無塵無菌，又要空氣新鮮，適宜工作。覆在通氣窗上的紗布應(yīng)經(jīng)常換洗。但是上述種種措施只是理想的設(shè)計(jì)方案，往往不易全面做到，其實(shí)只要嚴(yán)格無菌操作手續(xù)，在門窗敞開的室內(nèi)，有超凈臺(tái)的保護(hù)，接種的污染率仍可控制在生產(chǎn)上可以容忍的水平。
　　
　　超凈工作臺(tái)的使用管理
　　
　　（１）每次使用超凈工作臺(tái)時(shí)，實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)先開啟超凈工作臺(tái)上的紫外燈，紫外照射２０分鐘后使用。
　　
　　（２）開啟超凈工作臺(tái)工作電源，關(guān)閉紫外燈，并用７５％的酒精或０．５％過氧乙酸噴灑擦拭消毒工作臺(tái)面。
　　
　　（３）整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)按照無菌操作規(guī)程操作。
　　
　　（４）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用消毒液擦拭工作臺(tái)面，關(guān)閉工作電源，重新開啟紫外燈照射１５分鐘。
　　
　　（５）如遇機(jī)組發(fā)生故障，應(yīng)立即通知?jiǎng)游飳?shí)驗(yàn)室，由人員檢修合格后繼續(xù)使用。
　　
　　（６）實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)注意保持室內(nèi)整潔。
　　
　　（７）超凈工作臺(tái)的濾材每２年更換一次，并作好更換記錄。
　　
　　技術(shù)咨詢中心：廣州沃霖實(shí)驗(yàn)室設(shè)備有限公司